МИНИСТЕРСТВО ВЫСШЕГО
И СРЕДНЕГО СПЕЦИАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ РОССИИ
МОСКОВСКИЙ ОРДЕНА
ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ ФИЗИКО-ТЕХНИЧЕСКИЙ ИНСТИТУТ
ДИПЛОМНАџЯ РАБОТА
АТФ индуцированное изменение внутриклетоЧной
концентрации кальцияЯ в нейронах неокортекса крыс.НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ академик Магура И.С.
КОНСУЛЬТАНТ
к. б. н. Войтенко Н.В.
рецензент к.б.н.
Исаев Д
ДИПЛОМНИК
кругликов И.А.
Москва 1998
Оглавление
1.
ÂÂÅÄÅÍÈÅ………………………………………………………………………………………………………….. 4
2.
ÎÁÇÎÐ
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ…………………………………………………………………………………………. 5
2.1
Ãîìåîñòàç
êàëüöèßÿ â
íåðâíûõ
êëåòêàõ……………………………………………………… 5
2.1.1
Êàëüöèåâûå
êàíàëû
ïëàçìàòè÷åñêîé
ìåìáðàíû……………………………………………. 5
2.1.2
Êàëüöèåâûå
áóôåðû………………………………………………………………………………….. 7
2.1.3
Êàëüöèåâûå
êàíàëû
ýíäîïëàçìàòè÷åñêîãî
ðåòèêóëóìà……………………………….. 8
2.1.4 Êàëüöèåâûå
íàñîñû………………………………………………………………………………….. 11
2.1.5
Êàëüöèåâûå
îáìåííèêè………………………………………………………………………………. 13
2.1.6 Ñà2+-ñâÿçûâàþùèå
îðãàíåëëû………………………………………………………………….. 13
2.2 Вëèßÿíèå
ÀÒÔ íà
êàëüöèåâûé
ãîìåîñòàç………………………………………………….. 14
2.2.1
Ñòðîåíèå è
ñâîéñòâà
ÀÒÔ……………………………………………………………………….. 15
2.2.2
Íîìåíêëàòóðà
è
ñóáêëàññèôèêàöèÿ
ïóðèíîðåöåïòîðîâ……………………………….. 16
2.2.3 Ð1
ïóðèíîðåöåïòîðû………………………………………………………………………………….. 16
2.2.4 Ð2
ïóðèíîðåöåïòîðû………………………………………………………………………………….. 17
2.2.5
Ðåêëàññèôèêàöèÿ
ïóðèíîðåöåïòîðîâ………………………………………………………… 20
3.
ÎÁÚÅÊÒ È
ÌÅÒÎÄÛ
ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ………………………………………………………………… 21
3.1
Ïîäãîòîâêà
ïðåïàðàòà………………………………………………………………………………….. 21
3.2
Õàðàêòåðèñòèêè
êàëüöèåâîãî
çîíäà………………………………………………………… 22
3.3 Îêðàñêà
ñðåçîâ
ôëóîðåñöåíòíûì
êðàñèòåëåì…………………………………………… 24
3.4
Ñòðóêòóðà
ýêñïåðèìåíòàëüíîé
óñòàíîâêè
äëÿß
äâóõ-âîëíîâîãî
èçìåðåíèÿ
êîíöåíòðàöèè
êàëüöèÿß……………………………………………………………………………………………………………. 24
3.5 Ðàñòâîðû
è ñìåíà
ðàñòâîðîâ………………………………………………………………………. 27
4.
ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ
ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈÉ……………………………………………………………………… 28
5.
ÎÁÑÓÆÄÅÍÈÅ……………………………………………………………………………………………………. 39
6.
ÂÛÂÎÄÛ…………………………………………………………………………………………………………….. 41
7.
ÑÏÈÑÎÊ
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ…………………………………………………………………………………….. 42
1. ВВЕДЕНИЕ
Молекула АТФ давно известна как повсеместно
распространенный источник энергии для внутриклеточного метаболизма. Но ее
свойства как нейротрансмитера были обнаружены сравнительно недавно. Сегодня уже
не осталось никаких сомнений, что АТФ является нейротрансмитером в автономных
нейромышечных соединениях, ганглиях и центральной нервной системе. К примеру,
было показано, что АТФ вовлечена в генерацию болевых сигналов через Р2Х1 и Р2Х2 рецепторы. Однако роль и
распределение пуринорецепторов в коре головного мозга и особенно в моторной
коре до сих пор остается слабо изученной. Поэтому изучение механизмов действия
АТФ в коре головного мозга представляет несомненный интерес. Мы изучали
действие АТФ посредством измерения концентрации внутриклеточного кальция, –
одного из найболее важных и универсальных регуляторов клеточных функций.
Цель работы состояла в изучении
механизмов генерации АТФ – индуцированных внутриклеточных кальциевых сигналов в
нервных клетках моторной коры.